“广谱型”KA5402 CTGF(Human)ELISA试剂盒相关研究

在二十四个节气中的第二十个节气小雪到来的那一天,很多地方的小朋友是不是感觉进入了冰窖,恨不得裹上棉被出行?很多地方都迎来了初雪。但是在武汉,这一周都伴随着绵绵细雨,刮着凄冷的北风,小区里好不容易开的茶花都被打落一地,真的应了“落红不是无情物,化作春泥…哦不,是冬泥更护花”的景。
天气骤然变冷,想必很多老人也开始了老毛病,小编爷爷最近膝盖又开始疼了,为啥疼呢?没错,就是到了阴雨寒冷时节都会闹上一闹的内风湿关节炎。
类风湿关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病,其特征在于炎症和关节僵硬,最终导致组织破坏。结缔组织生长因子(CTGF)是RA进展的关键因素,可促进成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖,血管pan形成以及软骨和骨骼的损伤。
今天我们就来说说这个类风湿关节炎RA进程中的关键因素——结蹄组织生长因子(Connective tissue growth factor ,CTGF)。
结蹄组织生长因子(Connective tissue growth factor ,CTGF),也称为CCN2,是一个38 kDa的富含半胱氨酸(N端为22个半胱氨酸,C端为16个半胱氨酸),属于CCN的细胞外基质蛋白蛋白质家族。
结缔组织生长因子(CTGF)是涉及不同生物学过程(例如细胞增殖,血管生成和伤口愈合)以及多种病理(例如肿瘤发展、组织纤维化和类风湿)的关键信号和调节分子…….
想必小伙伴们对我说的这些理论一点也不感兴趣,毕竟CTGF的生物学功能、结构等研究方面的的文章一搜一大把,接下来我们来聊聊大家感兴趣的事——CTGF 的产品。

 

KA5402 CTGF (Human) ELISA Kit

首先,我们来介绍一下我们今天的主角:KA5402 CTGF(Human)ELISA Kit
1.检测原理

众所周知,这是个ELISA试剂盒,就是用ELISA的方法定量检测CTGF的试剂盒。它的检测原理:夹心酶免疫测定样本中的CTGF的量,捕获抗体已预孵育在板子上,然后将标准品或样品与CTGF特异的生物素偶联抗体制剂一起添加到合适的微量滴定板孔中;接下来,将结合到辣根过氧化物酶(HRP)的亲和素加入到每个微板孔中孵育;加入TMB底物溶液后,只有那些包含CTGF、生物素结合抗体和酶结合抗生物素的孔才会显示颜色变化;通过添加硫酸溶液终止酶-底物反应,并在450nm±10nm的波长处用分光光度法测量颜色变化;将样品的OD值与标准曲线比较,确定CTGF在样品中的浓度。

2.适用样本

咱们这个产品的适用样本属于“广谱型”:用于体外定量测定人血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液,细胞培养上清液和其他生物液体中的CTGF。适用人的哦,其他物种的样本请别用哈~~

注意事项:

【1】 5天之内使用的样品可以在4°C下保存,否则样品必须在-20°C(≤1个月)或-80°C(≤2个月)下保存,以免丧失生物活性和/或污染。

【2】 样品溶血会影响结果,不能检测到溶血标本。

【3】 进行测定时,将样品置于室温。

3.探测范围

46.8 -3000 pg / mL。ELISA标准曲线浓度分别为3000 pg/mL、1500 pg/mL,750 pg/mL、375 pg/mL、187 pg/mL、93.7 pg/mL、46.8 pg/mL。

4.灵敏度

CTGF最小可检测剂量一般小于17.5 pg/mL。

该方法的灵敏度,即检测下限(LLD)被定义为可以从零区分的最低蛋白浓度。通过在20个标准复制的平均光密度值上加两个标准偏差并计算相应的浓度来确定。

5.特异性

该方法检测CTGF敏感性高,特异性好。

CTGF与类似物之间没有明显的交叉反应或干扰。

注:受现有技术和知识的限制,CTGF与所有类似物之间可能存在的交叉反应性检测不可能全部进行,因此交叉反应性可能仍然存在。

6.回收率

在下面列出的基质中加入一定水平的重组人CTGF和回收率 通过将测量值与样品中CTGF的预期量进行比较来计算样品的含量。

7.线性

试剂盒的线性度测定方法是将样品加入适当浓度的人CTGF,并连续稀释。计算出的浓度与预期浓度的百分比表明了结果。

8.稳定性

ELISA试剂盒的稳定性取决于活性的丧失率。该试剂盒的活性丢失率小于5%,前提是在有效期内并在适当存储条件下。

特别注意

为了最大程度地减少对性能、操作步骤和实验室条件的不必要影响, 特别是室温,空气湿度和培养箱温度应严格控制。也强烈建议整个实验由同一实验者从头到尾进行。
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