这个野心不算小。
查遍中文和英文书籍，也只找到了两本比较系统专业介绍qPCR的：张惟材著的《生物实验室系列–实时荧光定量PCR》和M Tevfik Dorak的《Real-time PCR(Advanced Methods)》（Fig 1）。前者侧重于原理及应用，但几乎没有对实验标准化的介绍；后者可算是经典的qPCR技术大全了，但可惜年代稍久远（2007年），而且也并没有侧重于标准化。
Fig 1. Two books relevant to qPCR.
对于qPCR这样应用甚广，几乎每个分子实验室都离不开的技术，系统专业的书籍太少，可提供给实验者的参考也很少。从这个时候起，我的这个野心就算正式萌发了。我想尽可能的汇集关于qPCR技术的信息，从其原理、实验的标准化（重中之重）到包罗万象的应用、令人拍案叫绝的技术变种（FRET检测分子互作）。可能我个人的见识仍较浅薄，但是这个过程本身就是自我提升，同时也离不开各位读者的指正补充。
qPCR的标准化第一次在国际范围内达成共识是在2009年，Clin Chem上发表了‘The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCRexperiments’【1】（Fig 2），这就是MIQE的首次提出，第一作者Stephen A. Bustin是qPCR技术领域的大牛，很多关于技术革新和标准化的文章都出自他的实验室。中文翻译稿可参阅https://www.howsci.com/qpcr-miqe.html，但建议大家有时间还是去读一下英文原版。MIQE旨在指导形成统一的qPCR标准指南，从而提高实验的可重复性。后来针对qPCR的某一步骤陆陆续续有不少技术文章发表，作为MIQE的补充。
Fig 2. MIQE Guidelines in 2009.
我的计划是参考MIQE中列出的版块进行布局，但不拘泥于此。MIQE毕竟只是一个简略的checklist，很多细节，比如数据分析时如何在参数检验和非参检验中选择等，都没有详细解释说明。这个细节，恰恰是我觉得很重要的，所以会花大力气在完善上。
除了实验的标准化部分，我也会着重于应用的介绍和实验设计，如常规的基因表达、拷贝数变异，稳定的参考基因是必需的，而SNP实验则不需要考虑这一点，而更关注探针的特异性、模板的加样量等。我尽可能的按照目录先后排序来推送，最后肯定会补齐整个版块。
