一、仪器设备
二、试剂
3. 0.5mol/LEDTA缓冲液（ph：8.0）。
4. 1mol/L的TBS缓冲液（ph：8.0）。
1、脱蜡和水化：脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。
2、抗原修复：用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片：
微波炉加热：在微波炉里加热枸橼酸钠缓冲液至沸腾后将组织切片放入，至抗原修复液自然降至室温。
7）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟，甩去多余液体；
8）滴加一抗，室温静置1小时或4℃过夜或37℃1小时；
11）滴加二抗，室温静置或37℃1小时（二抗中可加入0.05%的 tween-20）；
13）DAB显色5-10分钟，在显微镜下掌握染色程度；
3）用蒸馏水或PBS配制新鲜的3%H2O2，室温封闭5-10分钟，用蒸馏水洗3次；
6）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟，甩去多余液体；
7）滴加一抗，室温静置1小时或4℃过夜或37℃1小时；
11）滴加试剂SABC 20℃-30℃ 20分钟；
a. 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时或4度过夜；
b. 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度；
c. DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准。
a. 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟；
b. 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长；
c. 组织中含内原性生物素 正常非免疫动物血清再封闭；
a. 抗体浓度过低、孵育时间过短 提高抗体浓度、孵育时间不能少 于60分钟；
c. 操作中添加试剂时缓冲液未沥干 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液使试剂稀释 （应防止切片干燥）；
d. 室温太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟或4 度冰箱过夜；
c. 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗二抗种属无误。
