Western Blot实验中为什么目的蛋白的分子量大小总会变来变去?

实验做久了,你会遇到很多说不清道不明的事情,我们有时把它归结成运气坏,有时把它归结成不可抗力,今天给大家列举出来几项,我们来一起分析和吐槽一下这些年做不明白的实验。

1、为什么目的蛋白的分子量大小总会变来变去?

 

本人最近在跑PECAM蛋白,该蛋白的目标分子量是80KDa左右。最开始选用的是12%的分离胶,目的蛋白的位置出现在80附近(选用的marker是上图的marker)

 

但是换用了8%的分离胶之后,目的蛋白出现在140KDa,而且连续几次蛋白,结果都是如此。好玩儿的是,我换回了12%的分离胶之后,蛋白分子量又回到80附近。

 

 

这类情况除了本人遇到以外,同实验室的另一个同学在跑其他蛋白的时候也遇到了同样的情况。两人使用的抗体都是单抗,也都是同一批次提取的蛋白,但是浓度不同的分离胶跑出的分子量大小却不同,这种情况又该怎么解释?难道分离胶的浓度也会影响蛋白出现的位置吗?

基础实验

Western Blot实验中为什么8%的分离胶仍然跑不开大分子量的蛋白?

2019-10-17 15:47:22

基础实验

Western Blot实验中为什么转膜之后marker都没有了?

2019-10-17 15:48:13

声明 本网站部分文章源于互联网,出于传递更多信息和学习之目的转载,并不保证内容正确或赞同其观点。
如转载稿涉及失效、版权等问题,请立即联系管理员;我们会予以修改、删除相关文章,请留言反馈
Notice: When your legal rights are being violated, please send an email to: [email protected]
0 条回复 A文章作者 M管理员
    暂无讨论,说说你的看法吧
个人中心
购物车
优惠劵
今日签到
有新私信 私信列表
搜索