基础实验

  • 动物组织培养准备技术之清洗与灭菌

    (一)使用过的玻璃器皿的清洗 1.使用过的培养用品应立即浸入清水,避免干涸难洗。 2.用洗涤剂清洗玻璃器皿,自来水清洗数遍。倒置自然干燥。 3.浸入酸性洗液过夜。将玻璃器皿浸泡2-4h后便可冲洗;当洗液使用时间过长,颜色由黑红色变成黑绿色甚至墨绿色时,应适当延长浸泡时间。当酸性洗液转变成绿色时,应重新配置洗液。浸泡时应使瓶内的所有玻璃表面都接触到洗液,勿留气…

    2020年4月3日 0 12
  • 细胞生长曲线的绘制(MTT法)

    1、无菌培养实验室准备(同细胞传代培养),从CO2培养箱中去除细胞,弃去培养液,加入0.25%的胰蛋白酶消化细胞,弃去胰蛋白酶液,使用新的含10%小牛血清的培养基制成细胞悬液后计数。 2、按照4×103细胞/孔接种于96孔板,0.2ml培养基/孔(如果是悬浮细胞,则0.1ml培养基/孔),做传代培养。设置3个空白对照孔,只加无细胞的培养基。 3、24h后加入…

    基础实验 2020年4月2日 0 33
  • 荧光原位杂交实验简介

    实验方法原理     荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进…

    2020年4月2日 0 13
  • 细胞凋亡的形态学检测方法有哪些?

    导读 细胞凋亡的早期形态学改变是核染色质浓聚、固缩,聚集在核膜周边,然后是胞浆浓缩、胞膜起泡,继而细胞核裂解成若干碎片,细胞膜将胞质和染色质断片包裹,胞浆内形成多个膜结构尚完整的“小泡”及 “凋亡小体” (apoptoticbody)。这不同于细胞坏死的细胞肿胀、胞膜破裂、细胞崩解。 根据凋亡细胞固有的形态特征,至今为止,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态…

    2020年4月1日 0 28
  • 细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 法

    实验原理:Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还…

    2020年4月1日 0 21
  • 入门Western blot日常实验中容易忽略的小细节

    一、Western blot篇 网站上讲WB的文章有很多,在这里,我主要是想给大家讲一下电泳仪的维护:整套电泳仪里最贵的部位也是最重要的部位就是正负电极和连接整体的电极丝。但是电泳液对电极是有腐蚀性的,不知道大家有没有注意过一点,当你电泳槽中注满电泳液时,电泳结束后,正负电极头的周围会有蓝色的沉积出现(如下图) 这就是电泳液腐蚀电极的表现。虽然这种现象短时间…

    2020年3月29日 0 22
  • ELISA实验没读值怎么办?

    酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是最基础的免疫学实验之一,相信很多科研狗都有过使用 ELISA 的经历。 ELISA 操作简单,不需要特殊仪器,一台酶标仪即可完成检测。看似简单,实则不然。ELISA 是个非常严谨、极考验操作者技巧和经验的实验,检测结果没有读值、高 CV 值、高背景等诸多问题…

    2020年3月25日 0 25
  • 细胞冻存简介

    1、培养室实验准备工作大致同细胞传代培养的前6个步骤。简言之:用紫外消毒等消毒超净工作台面;清洗消毒手部;观察细胞;预热培养用液;点燃酒精灯;取出巴斯德吸管、刻度吸管等插在无菌试管内。 2、冻存液的配置:按如下比例配置:10%甘油+90%培养基,或者10%DMSO+90%培养基。用于配制冻存液的培养基中小牛血清浓度适量提高至20%或更高。所用的甘油需事先高压…

    基础实验 2020年3月24日 0 52
  • 细胞培养方法(十二):细胞计数

    细胞计数 在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高,可使染料进入细胞内而使细胞…

    2020年3月23日 0 58
  • 细胞培养方法(十一):流式细胞术鉴定表面抗原

    流式细胞术鉴定表面抗原 1实验方法 1.用6孔板培养细胞,待细胞生长达到60%-70%,弃掉旧培养基。收集对应细胞培养基到一离心管内备用。 2.用0.25%胰酶消化细胞,至细胞变圆,加入前面收集的细胞培养基,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞,收集到离心管内(注意:悬浮细胞不需要胰酶消化,直接收集到离心管即可)。 3.200g离心5min,沉淀细胞。对于特…

    2020年3月23日 0 59

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