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为啥做个实验老出问题?5个要点需注意

最近A特郁闷,向我抱怨:“前段时间细胞培养一直很OK,怎么这次出现了问题。”我让他把实验过程仔细说一下,结果发现他在处理贴壁细胞时,把培养基吸出、加入PBS准备消化的时候,有人找他,所以他就把细胞直接放进培养箱中了,1h后,再来处理时,发现细胞飘起来了,现在看来,实验失败的原因就是因为细胞在PBS环境中太久从而导致的。

再说B,最近也是唉声叹气,细胞复苏后,细胞你侬我侬,根本吹不散。仔细一问,发现他从液氮罐中拿出细胞后就把细胞放在-20℃冰箱中暂存了。他认为冻存细胞放在-20℃也是冻存状态,也没有融化丫,怎么就不行了。

我们怎么样能够在做实验的时候少犯错呢?以下总结几点,希望对你有用:

1、提前确定方案

实验开始之前,一定要先确定方案,而且是越详细越好。特别是对于实验成败的关键点更要详细说明,设置关键控制点和关键控制参数。在实验设计之初,我们应该把实验的每个细节都考虑到;例如:配液的顺序,有些试剂是否会起相互作用,在配制时应该先加哪个后加哪个,配制时是否需要缓慢加入。例如:产量。做5L的发酵罐实验和做100L的发酵罐实验,所考虑的点是截然不同的。消化1个175cm2培养瓶和消化10个175cm2培养瓶所考虑的点也是不同的。

2、明确风险点,提早做准备

做一个实验项目前,要明白其具有的风险点。例如试剂厂家突然断货了,这就需要我们在设计之初就有备选的厂家、品牌。例如成本经费,在设计之初,就要明白你这个实验需要多少钱?多少人?什么设备?什么资源?在设备没有的情况下,有没有可以替代的设备等等。切勿实验做到一半,经费已经用完了。

3、及时沟通,不闭关锁国

在最开始的阶段,很多学弟学妹因为害怕导师,所以每次都是避开导师走,甚至在实验卡壳的情况下,仍然因为害怕导师的责罚选择自己承受,结果可想而知,实验一拖再拖,论文也写不出来。其实在遇到问题的时候,一定要与导师及时沟通,请求别人的帮助。当然有些人想找导师,导师整天不在国内的也有,这种情况下,可以与导师邮件沟通,反正一句话,如果自己实在没辙,一定要想尽一切办法寻求帮助。除了之外,最好养成定期汇报的习惯。不然也许实验最终的结果和BOSS要的结果相差十万八千里。

4、不画蛇添足

很多时候,我们做实验,是有现成方法的,可是有些人喜欢往里面自己加步骤。K遇到的某个师弟就是这样,这位仁兄老是实验失败的原因,就是不按照K给的方案,而是自己另行一套方法,而且每次都觉得自己好有道理。

5、细心真的很重要

做实验的时候,走神真的很容易,想当初做实验,不是忘记做阳性对照就是加96孔板时少加了一个样。当然这些还属于小错误;曾经,在一个实验室,L出库冻存细胞时,把整个冻存栏都拿出来了,结果拿好自己的细胞,冻存栏居然忘记放回去,30min后发现时,所有细胞都自然融化了。后来L哭得梨花带雨去找导师,导师第一反应是“这么绝望,难道你把实验室炸了???”

最后,不要害怕,常在河边走哪有不湿鞋,谁的路上没有出现过错误。所以学会坚持吧,坚持一点,有些时候实验看起来毫无进展,你想让它有进展的唯一办法就是“去做”,就像汽车导航一样,有时开动了,才知道该往左边还是右边。

来源: http://www.sci666.com.cn/24484.html

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