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如何避免人类及实验环境带来的细胞污染

WHAT,人类和环境才是微生物污染的主要来源!
 
据调研,细胞培养过程中的污染,约三成来自细胞系、培养基和器皿,七成来自人类或实验室环境
 
细胞系、培养基和器皿来源的污染可以通过正规的采购渠道,以及严格的除菌操作来降低风险,但来自人类及实验环境带来的污染该如何避免呢?
01
细胞培养过程中环境污染是如何发生的呢?

 

众所周知,细胞娇嫩如婴儿,而二氧化碳培养箱就像培育这些小婴儿的育婴房,可在培养过程中为其提供稳定的温度(37 ℃)、一定的二氧化碳浓度(5%)和高饱和度的湿度(95% RH),模拟一个接近体内的培养环境。

 

同时,这种环境为微生物的污染创造了极为便利的条件:

 

▶ 取放细胞时引起的污染
细胞培养过程中,取放细胞是最基本的操作,培养箱开关门的瞬间,环境中的微生物或多或少会进入培养箱中,而且内外温差导致内门冷凝水的产生,极易吸附微生物,都是造成培养箱污染的风险因素。
 
▶ 灭菌不彻底造成的二次污染
细胞培养过程中,因其它操作问题(如培养基泼洒,水盘污染等),造成培养箱的大规模污染也时常会发生,此时就需要对培养箱进行灭菌消毒,常规的消毒(如紫外照射)只能达到表面消毒的效果,特别是对真菌等顽固性污染,无法进行彻底灭菌,导致后续培养过程中细胞污染频发。
 
由此可见,来自人类或实验室环境带来的污染需要规范的操作和环境控制进行消除。
 
 
02
如何有效避免培养箱污染呢?

 

▶ 重视细胞房管理工作,规范操作
定期进行细胞房清洁消毒工作,规范实验人员操作(如身着白大褂、换鞋等),创造洁净培养环境。

 

▶ 对于初学者,避免频繁查看细胞
做好实验规划,减少培养箱门开关的频率,取放细胞时需佩戴洁净的手套,并用少量的 70% 医用酒精(过多会导致培养箱中残留乙醇蒸汽)擦拭培养瓶/皿表面,从而降低细胞培养箱污染的风险;

 

▶ 定期维护和灭菌,预防污染
定期清洁维护,培养箱内用水灭菌后使用并定期更换,一旦发生污染,及时灭菌。选择培养箱时,可优先考虑有自动灭菌功能的培养箱。
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