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外泌体(Exosomes)分离和储存方法总结

外泌体(Exosomes)是由绝大多数细胞自然分泌的、直径约为30-200nm、在蔗糖梯度中浮力密度在1.10-1.21g/ml之间的膜性囊泡,主要为磷脂双分子层结构。 
Exosomes天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳等。 
FrontPhysiol. 2012;3:145
 
一、外泌体分离方法汇总
1. 超离
Theranostics 2017, Vol. 7,Issue 3
 
2. 密度梯度离心
 
Theranostics .2017, Vol. 7, Issue 3

 

3. 蔗糖密度梯度离心
4. 碘克沙醇密度梯度离心
INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE. 2015. 36: 11-17
 
5. 超滤
Journalof Extracellular Vesicles 2015, 4: 27031
 
  6. Size-basedisolation techniques
Theranostics2017, Vol. 7, Issue 3
 
7. 色谱 
JOURNAL OF EXTRACELLULAR VESICLES, 2017 VOL.6, 1286095
 
8. PEG聚合物沉淀
样品中加入PEG80004°C过夜孵化后通过低速离心法或过滤法隔离含有外泌体的沉淀。
                                           Theranostics2017, Vol. 7, Issue 3

 

9. 微流控
微流控(Microfluidics):指的是使用微管道(尺寸为数十到数百微米)处理或操纵微小流体(体积为纳升到阿升)的系统所涉及的科学和技术。微流控检测芯片一般具有样品消耗少、检测速度快、操作简便、多功能集成、体小和便于携带等优点,因此特别适合发展床边(POC)诊断。
   Theranostics 2017, Vol. 7, Issue 3
 
10. 分离新技术-声波联合微流控
 www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.1709210114

 

外泌体在不同的疾病发病机理中具有重要功能,以上介绍了10种用于从生物体液获得并分离外泌体的方法,各有优缺点,从nature、science和cell上发表的文章来看,超离技术仍然是很常见的技术,但其它的方法也有满意的结果,并且可以有效地应用于实验室研究和临床医药。

 

二、实例分析
1. 血浆中分离外泌体
2. 尿液中分离外泌体
3. 唾液中分离外泌体
(A)ExoQuick-TC TM (EQ)          (B) ultracentrifugation (UC)
 
4. 实体组织中的外泌体分离
5. 汗液中的外泌体分离
三、外泌体的储存
现抽现用最好,4°C短期保存, -80°C长期保存。
       JExtracell Vesicles. 2017 Aug 13;6(1):1359478. 

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