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养细胞时培养基该如何选择

MEM

 

MEM(Minimum Eagle medium 低限量Eagle培养基),它仅含12种必须氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。广泛适用于各种已建成细胞系的培养,同时添加或减少某些成分,也适于特殊细胞的培养。如Hela细胞、各种成纤维细胞、内皮细胞、人肿瘤细胞等。是哺乳动物细胞的理想培养基,通常用于贴壁细胞的培养,通过对配方进行修正,可以用于其他类型细胞的培养,如无钙MEM培养基可以用于悬浮细胞的培养,含有Hank’s盐的MEM培养基可以用于二倍体细胞的培养。

 

DMEM

 

分为高糖和低糖,碳酸氢钠缓冲体系。是在Eagle MEM基础上增加了各成分的用量(加倍),葡萄糖可以选择低糖(1000mg/L)和高糖(4500mg/L),对于生长速度快,附着性差的肿瘤细胞生长有利。特别在附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养时,采用高糖浓度的培养基效果较好,常用于杂交瘤技术中骨髓细胞和DNA转染的转化细胞培养以及疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养。。

 

DMEM/F12

 

DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。

 

RPMI-1640

 

主要用于悬浮细胞培养,广泛用于哺乳物,特殊造血细胞,正常或者恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞。另外K-562, L-60、urkat、IM-9 等淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞也可以使用。

 

McCoy’s 5A

 

主要用于肉瘤细胞的培养,还可以用于骨髓、皮肤、肺等原代培养,用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。比如HT29,BHL100等上皮细胞。

 

IMDM

 

IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium)即 Iscove 改良的 DMEM 培养基,是 Guilber 和 Iscove 在1976年设计的,用以培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。IMDM 培养基在 DMEM 培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙  酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,并用硝酸钾代替了硝酸铁,营养非常丰富,非常适合于快速增殖,高密度细胞  培养。IMDM 培养基不仅可以培养有特殊营养要求的细胞(如小鼠 B 淋巴细胞,LPS 刺激的 B 细胞,骨髓造血细胞,T淋巴细胞以及各种杂交瘤细胞),还可以作为一些独特的无血清培养基的基础液。

 

M199 Medium

 

1950年Morgan等设计的具有确定化学成分的细胞培养液,即M-199。除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。培养基199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶和其他维生素,可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。现广泛用于病毒学、疫苗生产。

 

L-15(Leibovitz Medium)

 

L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。适用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株,用于快速增值瘤细胞的培养。

 

Ham’s F-10 

 

1963年Ham设计,含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F10适用于仓鼠、人二倍体细胞,特适于羊水细胞培养。

 

Ham’s F-12

 

原配方 Ham’s F-12 培养基适用于在无血清的条件下培养 CHO 细胞。Ham’s F-12 营养培养基以 Ham’s F-10 培养基的配方为基础,提高了胆碱、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度。其中含有 1800 mg/L 的D-葡萄糖,以及酚红、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、碳酸氢钠,不含 HEPES。适用于无血清CHO细胞的生长,取代血清,适合哺乳动物细胞的培养(大鼠-干细胞和大鼠-前列腺细胞),同样适用于癌细胞、大鼠成肌细胞、中国仓鼠肺细胞和大鼠、家兔、鸡胚胎细胞。

 

MCDB131

 

MCDB 培养基是用于某些特殊细胞类型的培养,是无血清培养基。这个培养基需要配添加生长因子,微量元素(trace elements)或者低水平透析胎牛血清。每个MCDB培养基的配方均适合特殊类型细胞的培养,MCDB131最初开发是用于人微血管内皮细胞(HMVEC)的培养,现也可用于肝脏细胞、平滑肌细胞、心肌细胞及其他细胞的培养。

 

Opti-MEM I Reduced Serum Media

 

Opti-MEM I还原血清培养基是EMEM 的改良型培养基,其中使用了 HEPES 和碳酸氢钠进行缓冲,并添加次黄嘌呤、胸苷、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、痕量元素和生长因子。可使胎牛血清的量减少50%,且不改变生长速度或形态。Opti-MEM I培养基可用于多种哺乳动物细胞的悬浮和粘附,包括Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK和原代成纤维细胞。

 

最后给大家下图不同细胞的培养基及血清的适用类型,以供大家实验参考。

 

养细胞时培养基该如何选择

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  • 单ing
    单ing 2019年7月20日 下午2:02

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